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这是一台非常强大且专一的定量分析仪器,主要用于对核酸和蛋白质进行精确定量。简单来说,它的核心功能就是回答“我的样本里到底有多少DNA/RNA/蛋白?"这个问题,并且回答得非常准确。以下是Qubit Flex荧光计可以完成的主要实验和其核心特点:
一、赛默飞蚕耻产颈迟贵濒别虫荧光计核心实验功能:精确定量
Qubit Flex使用的荧光染料技术,这些染料只与特定的目标分子(如双链DNA)结合并发光,因此不受其他污染物(如RNA、游离核苷酸、盐离子等)的干扰,结果比传统紫外分光光度法(如NanoDrop)更精确、更专一。
1、核酸定量
dsDNA HS/Broad Range Assay: 这是常用的功能。高灵敏度(HS) 模式可精确测量10 pg/μL - 100 ng/μL的微量DNA,非常适合下一代测序(NGS)、微阵列分析、PCR等珍贵样本。宽范围(BR) 模式则用于测量浓度更高的样本。
ssDNA Assay: 专门用于定量单链DNA,这在某些分子生物学应用中非常重要。
RNA HS/Broad Range Assay: 专门用于精确测量RNA的浓度,对转录组学、qRT-PCR等实验至关重要。
miRNA Assay: 无需单独分离,可直接从总RNA样本中精确量化microRNA这类小RNA,对 miRNA研究非常方便。
2、蛋白质定量
Protein Assay: 使用与特定氨基酸残基结合的荧光染料,精确测量蛋白质浓度,范围是1 - 500 μg/mL。这对于蛋白质纯化、Western Blot前的样本准备等实验非常有用。
二、赛默飞蚕耻产颈迟贵濒别虫荧光计优势与高级功能
Qubit Flex不仅仅是台简单的定量仪,它的“Flex"(灵活)体现在以下几个方面:
1、8联管高通量检测:
特点是支持8连管(strip tube),一次最多可以同时检测8个样本,极大地提高了效率,特别适合需要处理大量样本的实验室。
2、大彩色触摸屏与直观界面:
内置大型交互式触摸屏,操作简单直观,可以直接在仪器上查看结果、图表和实验设置。
3、内置标准曲线和多种应用流程:
仪器内置了预编程的实验流程(Protocols),用户只需选择对应的检测项目(如dsDNA HS),然后按照屏幕指示加入样品和染料即可,无需自行制作标准曲线(但每批实验仍需做1-2个标准点进行校准)。
4、支持免提操作(丑补苍诲蝉-蹿谤别别):在安装好转子并开始运行后,转子会自动旋转到每个孔进行测量,无需手动移动样品管。
5、数据管理和输出:
可以将结果直接通过鲍厂叠导出,方便进行记录和进一步分析。
叁、蚕耻产颈迟贵濒别虫荧光计典型应用场景
1、NGS文库定量(最关键的应用): 在构建好NGS测序文库后,必须对文库进行精确定量,以确保上机测序时加载的DNA量准确无误,这是获得高质量测序数据的关键步骤。Qubit Flex的高通量和精确性使其成为NGS平台的“黄金标准"。
2、qPCR/qRT-PCR模板定量: 准确定量cDNA或gDNA模板浓度,是确保PCR反应效率和结果可靠性的前提。
3、蛋白质组学分析: 在蛋白质提取、纯化后,精确测定蛋白浓度,以便在后续实验(如酶解、Western Blot)中上样等量蛋白。
4、质量控制(QC): 对提取的核酸或蛋白样本进行质量检查,确保样本浓度符合下游实验要求。
四、总结
Qubit Flex荧光计是一台专为生命科学实验室设计的高通量、高灵敏度的精密定量仪器。 它的核心价值在于:
1、精准: 对特定目标分子(DNA, RNA, Protein)进行特异性定量,结果可靠。
2、高效: 8联管设计适合中高通量样本检测,节省时间。
3、易用: 触摸屏和内置流程使操作非常简单。
如果您的实验需要精确知道核酸或蛋白的浓度(尤其是样品珍贵或浓度很低时),例如进行NGS、高级PCR、蛋白质研究等,Qubit Flex是非常理想的选择。如果只是想快速了解一下样本的大概浓度和纯度,NanoDrop则更快捷经济。许多实验室会同时配备这两种仪器,用于不同目的的质量控制。