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Qubit Flex是一款用于精确定量核酸(DNA、RNA)和蛋白质浓度的仪器,其核心原理是使用特定的荧光染料,这些染料只与目标分子结合并发出荧光。
一、核心检测试剂(Assay Kits)
1、 核酸定量试剂盒(常用)
(1)Qubit dsDNA HS Assay Kit:常用的试剂盒,用于高灵敏度定量双链DNA。线性范围广(0.2 pg/μL 至 100 ng/μL),对dsDNA特异性高,不受RNA、单链DNA或游离核苷酸的干扰。适用于下一代测序(NGS)、克隆、PCR等对DNA浓度要求精确的应用。
(2)Qubit dsDNA BR Assay Kit:用于定量高浓度双链DNA。线性范围较宽(2 pg/μL 至 1,000 ng/μL),但灵敏度不如HS试剂盒。适用于浓度较高的DNA样品,如质粒提取、基因组DNA等。
(3)Qubit RNA HS Assay Kit:用于高灵敏度定量RNA。能有效区分RNA和DNA,专门用于评估RNA样品的纯度和浓度,例如在转录组测序、qRT-PCR前使用。
(4)Qubit ssDNA Assake Kit:用于定量单链DNA,例如寡核苷酸、引物等。
(5)Qubit microRNA Assay Kit:专门用于定量微RNA(miRNA)等小RNA,灵敏度高。
2、蛋白定量试剂盒
(1)Qubit Protein Assay Kit:用于快速、准确的蛋白质浓度定量。相对于传统的UV吸光度法(A280),它特异性更强,不受污染物(如游离氨基酸、去污剂等)的干扰。
(2)Qubit Protein BR Assay Kit:用于较高浓度范围的蛋白质定量。
选择建议:对于绝大多数分子生物学实验,Qubit dsDNA HS Assay Kit 是您的必需品。
二、通用实验耗材
这些是每次实验都需要用到的消耗品。
1、Qubit 检测管
这是最关键的耗材。Qubit Flex使用的是专属的、特制的0.5 mL薄壁笔颁搁管,其透明度和尺寸经过精确校准,以确保荧光读数的准确性。
重要提示:必须使用赛默飞原厂或认证的Qubit检测管。使用普通的、未经认证的笔颁搁管会导致结果严重不准,因为普通管子的透光性和荧光背景不同。试剂盒通常会附带一定数量的检测管。
2、无酶水
用于稀释试剂盒中的工作液和您的样品。必须使用高纯度的无核酸酶、无蛋白酶的水(如DNase/RNase-Free Water),以避免污染和背景干扰。
3、移液器及配套吸头
需要精确的移液器(如0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL)和无核酸酶、无热原的滤芯吸头,以确保加样的准确性和避免交叉污染。
4、微型离心机
用于在测量前瞬时离心检测管,将管壁和管盖上的液体离心至管底,避免气泡干扰,确保液体体积准确。
5、涡旋混合器
用于充分混匀试剂和工作液。
6、计时器
蚕耻产颈迟试剂有明确的孵育时间要求(通常为2-3分钟),需要一个计时器来确保所有样品孵育时间一致。
叁、总结清单
1、核心试剂
必需品:Qubit [检测项目] Assay Kit
说明:根据样品选择,如dsDNA HS, RNA HS, Protein等
2、关键耗材
必需品:Qubit检测管 (0.5 mL)
说明:必须使用认证过的专用管
3、通用耗材
必需品:无酶水 (DNase/RNase-Free)
说明:用于稀释
必需品:精确移液器和滤芯吸头
说明:确保加样准确,避免污染
必需品:微型离心机、涡旋混合器、计时器
说明:标准实验室设
在使用前,请务必阅读您所购买试剂盒的详细说明书,并访问赛默飞获取Qubit Flex的用户手册和新信息。正确的耗材和规范的操作是获得可靠数据的基础。